|
Koncentriranje fitoplanktona Avtor: Roman Luštrik |
|---|
|
|
|
V hobiju nekateri akvaristi že mnogo let gojijo različne vrste fitoplanktona, katerega uporaba zavisi od hranjenja mladic preko kotačnikov, hranjenje kopepodov (majhni rakci), hranjenje artemij, različnih larv nevretenčarjev in pa direktno hranjenja akvarija, kjer z malo sreče nahranimo različne jedce fitoplanktona kot so razni črvi cevkarji, morska jabolka, verjetno pa tudi nekatere korale. Gojenje fitoplanktona kot hrana seveda ni nova ideja, ribje farme ga za vzgojo mladic gojijo že desetletja. Za uspešno pridobivanje večjih količin fitoplanktona potrebujemo zračno črpalko, nekaj cevi manjšega premera, odpadne plastenke ali steklenice, sol, vodo, gnojilo in pa seveda začetno kulturo, ki lahko znaša le nekaj mL, vendar pa moj namen ni opisovati tehnik gojenja... Vsaj ne tokrat.
Na Oddelku za biologijo, Kátedri za biokemijo so mi dali v uporabo nekaj opreme in laboratorijski prostor. Koncentriral sem z dvema metodama. Prva metoda je bilo koncentriranje s centrifugiranjem. V centrifugirni posodi (centrifugirki) sem nalil približno enako količino fitoplanktona (~80mL), na precizni elektronski tehtnici pa do stotinke grama natančno umerili, da je bila teža obeh centrifugirk enaka, saj tako prepreči "poskakovanje" med centrifugiranjem. V centrifugo moramo centrifugirke postavljati v paru. Centrifugo sem sprogramiral na 10 minut pri 2000 obratih na minuto (rpm). Zavora v centrifugi je bila izključena, saj zna zaviranje ponovno suspendirati vzorec.
Drug način koncentriranja je bilo nučiranje. Nučiranje je v praktičnem pomenu filtrirna metoda, katero pospešimo z ustvarjanjem podtlaka s pomočjo vodnega toka. Kvaliteta in hitrost filtriranja je seveda odvisna od zamreženosti in površina filtra ter moči vodne črpalke. 200mL fitoplanktona sem zlil v zbirno posodo nad filtrom in čakal, dokler se ni vsa vsebina prefiltrirala. Nato sem odklopil vodno črpalko in z minimalno količino kultiviranega fitoplanktona filter spral. Vizualno je bila gostota (temnost) primerljiva med 160mL centrifugiranega in 200mL nučiranega vzorca. Pod mikroskopom sem opazil, da je bilo v centrifugiranem vzorcu nekoliko več skupkov celic, kar verjetno ni zelo ugodno. Tudi že na objektnem stekelcu je bilo videti skupke, česar pri nučiranem vzorci ni bilo. V obeh vzorcih je bilo približno enako razmerje premikajočih in mirujočih celic. Ob pregledu kontrolnega vzorca (čist gojen fitoplankton) je to razmerje tudi zelo podobno. Razmerje sem ocenil po občutku, saj je bilo celic na enem vidnem polju preveč za štetje.
V zaključek bi ponudil ugotovitev, da je centrifugiranje nekoliko bolj učinkovito, vendar pa se pojavlja nekaj zadržkov, kot so skupki celic, tehnološko pa je tudi bolj zahtevno. Z nučiranjem, ki je tehnološko manj zahtevno, dobimo približno enako število celic iz približno enakega volumna izhodnega vzorca. Zahvalil bi se Kristini Sepčić in Ireni Pavešič za strokovno in tehnično pomoč pri izvedbi poizkusa.
Komentarji na članek so možni na forumu |